GLP實驗動物設施中屏障環(huán)境是設施的核心組成部分，為了保證屏障環(huán)境工作的正常運轉(zhuǎn)，不僅要長期固定的為屏障環(huán)境內(nèi)的實驗動物提供適宜的溫度、濕度、光照等，還要做好屏障環(huán)境消毒工作。并且定期檢測消毒效果，保證屏障內(nèi)動物無特定病原微生物的感染，避免影響實驗動物健康和實驗結(jié)果。其消毒方法根據(jù)性質(zhì)可分為物理消毒方式和化學消毒方式。不同的對象進出屏障環(huán)境所選用的方式方法也不同，這是依據(jù)其本身性質(zhì)而決定的。
屏障設施消毒范圍包括屏障內(nèi)環(huán)境與實驗輔助環(huán)境。除環(huán)境消毒外還包括飼料、墊料、飲用水、籠具、飲水瓶、實驗用具、清潔工具等物品。消毒工作應用到的設備如高壓蒸汽滅菌器、紫外線照射傳遞窗、噴壺等。
一、屏障環(huán)境的消毒
1.屏障環(huán)境啟用前的消毒
對于屏障環(huán)境啟用前的消毒常采用甲醛-高錳酸鉀熏蒸消毒(又稱福爾馬林熏蒸消毒法)，通過計算房間體積，按照房間每立方米體積用甲醛溶液42ml、高錳酸鉀21g以及水21ml計算試劑用量。熏蒸消毒前應把房間內(nèi)被消毒物品表面擦拭干凈，甲醛、高錳酸鉀熏蒸48~72小時后，通風24~48小時以上工作人員可以進入，依據(jù)《實驗動物環(huán)境及設施》附錄沉降菌檢測方法檢測甲醛熏蒸消毒后房間內(nèi)的沉降菌數(shù)量。如果檢測沉降菌數(shù)≤3個，即符合消毒標準要求。
2.屏障環(huán)境使用中的維護性消毒
屏障環(huán)境使用初期往往是無菌的，隨著試驗的開展，工作人員的進入難免會破壞屏障環(huán)境的清潔度。為此GLP機構(gòu)均制定了一系列維護性清潔消毒工作。本安評中心GLP實驗室屏障環(huán)境內(nèi)每日對籠架臺面、工作臺面、地面及易污染區(qū)域用清潔并用消毒劑進行擦拭消毒。每周兩次對房間內(nèi)環(huán)境天花板、墻面、門等用消毒劑進行噴霧消毒。按照SOP規(guī)定對所消毒環(huán)境進行檢測消毒效果。對于未開展實驗處于空閑的房間每周對臺面、地面擦拭消毒一次，每月一到兩次噴霧消毒。
二、物品進入屏障環(huán)境的消毒
對于使用后的籠盒、籠蓋、飲水瓶、瓶塞等物品需要先清潔消毒工作，本單位選用先洗刷后浸泡消毒，再沖洗晾干的順序來清潔物品。物品晾干后再次進入屏障環(huán)境需要根據(jù)材質(zhì)的不同選擇滅菌方式。例如高壓蒸汽滅菌容器可以對能承受高壓、高濕環(huán)境的物品消毒，如籠具、飲水瓶、飼料、墊料、抹布等物品的消毒滅菌。傳遞窗是對不耐高溫、高壓或不能水浸的物料消毒的方法。傳遞窗連通著屏障外環(huán)境與屏障內(nèi)環(huán)境，是普通級別區(qū)域與屏障環(huán)境級別的連通器。物品從一側(cè)放入，外表用消毒劑噴霧消毒后，開啟紫外線燈照射15~30分鐘后從另一側(cè)將物品取出。
三、人員進入屏障環(huán)境的消毒
人員流向：工作人員更換工作鞋→登記本人姓名、進入目的以及進入時間→從工作輔助走廊進入第一更衣室→脫去個人外衣(包含飾品等)放入衣柜，赤腳進入第二更衣室→手放于消毒機下面噴霧消毒→帶一次性口罩、帽子、手套→拿取連體無菌衣，在黃色區(qū)域內(nèi)穿好→手再次噴霧消毒→進入風淋室→清潔走廊→到清潔庫房拿取試驗所需要的物品→進入飼養(yǎng)房間→試驗結(jié)束后進入污物走廊→通過緩沖間返回工作輔助走廊→在第一更衣室門口脫去連體無菌衣、口罩、帽子、手套→進入第一更衣室穿取個人衣物→穿好后離開第一更衣室登記離開時間，出屏障環(huán)境。
從人員流向來看，人員經(jīng)過了徹底的清潔保護和消毒工作，穿取有效的隔離防護后才進入到屏障環(huán)境內(nèi)。屏障環(huán)境是進出工作人員和建筑設施共同維護和保障的融合整體。人員管理要求的科學規(guī)范與工作人員的切實執(zhí)行都是保持微生物凈化意義的必要條件。所以每一名工作人員均需要參加培訓增強無菌意識并且按照地方要求持證(實驗動物從業(yè)上崗證)上崗。
四、實驗動物進入屏障環(huán)境的消毒
保障實驗動物安全，屏障環(huán)境要具備檢疫室。本安評中心設有檢疫室，并在檢疫室與屏障外環(huán)境之間設置了實驗動物傳遞窗。
實驗動物流向：新購買的實驗動物由廠家裝在SPF級實驗動物運輸盒中→檢查外包裝是否完整→通過盒子上方觀察口觀察實驗動物是否成活且健康→如無異常則用消毒液(一般為75%酒精)噴霧消毒運輸盒→放入實驗動物傳遞窗內(nèi)，開啟紫外線燈照射10min→傳入檢疫室→大鼠、小鼠先稱取體重并作檢疫觀察記錄→按照SOP規(guī)定檢疫5~ 7天合格后→進入實驗室進行試驗。
五、新風進入屏障環(huán)境的消毒
新風依靠初、中、高效三級過濾凈化系統(tǒng)進行物理性滅菌，通過過濾凈化使屏障環(huán)境內(nèi)的空氣潔凈度等級達到7級(原標準的10000級)?？諝膺^濾系統(tǒng)中的初效過濾器、中效過濾器和高效過濾器材料需要及時更換保證設施空氣質(zhì)量。其中春秋天的初、中效過濾器污染堵塞嚴重，需要頻繁更換保證空氣質(zhì)量。高效過濾器如更換不及時，往往會在高效過濾器堵塞后出現(xiàn)房間壓力壓差不能保證目標要求的現(xiàn)象。
新風流向：室外空氣→通過初效過濾器→空調(diào)機組→加濕器→風機(主、備交換)→中效過濾器→送風閥→除濕電加熱→送風防火閥→送風風道→高效過濾器→送風口→從屋頂進入室內(nèi)→通過排風口→回風管道→建筑頂部排出
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